Unión P[3H]-QNB al receptor muscarínico humano en presencia de diferentes buffers / Union of P[3H]-QNB at muscarinic receptor human in presence of different buffers

Se estudio el perfil de unión de [3H]-Benzilato de Quinuclidinilo ([3H]-QNB) al receptor colinérgico muscarínico (RCM) de corteza frontal (CFH) e hipocampo humano (HPH) en presencia de diferentes buffers. Cuando las fracciones de CFH se prepararon y ensayaron en Buffers TRIS, FOSFATO o HEPES, la unión fue compatible con una discreta cooperatividad homotrópica positiva (coeficiente de Hill: 1.10-1.37). Cuando los ensayos de unión de [3H]-QNB al RCM de CFH se realizaron con buffers imidazol o citrato, la cinética resultó hiperbólica simple. El fenómeno de cooperatividad positiva se encontró en HPH mediante el uso de buffer fosfato, pero no con iris e imidazole. El uso de borato como buffer para preparar y ensayar las fracciones de CFH o HPH indujo una cinética compatible con cooperatividad homotrópica negativa o heterogeneidad, con 32-36 por ciento de sitios de alta afinidad y 64-68 por ciento de baja afinidad. El efecto inhibitorio de la fuerza iónica sobre la unión de [3H]-QNB fue similar en borato, imidazol, tris, herpes y citrato. A altas concentraciones, el efecto del buffer fosfato fue también inhibitorio, sin embargo, a bajas concentraciones, se observó un 10 por ciento de aumento en la unión. Estos resultados sugieren que la unión de [3H]-QNB al RCM humano es compleja y dependiente de las condiciones del medio.

Noncompetitive inhibitors of the acetylcholine receptor help paint a picture of its ion channel

This review describes and analyzes the evidence from studies using noncompetitive inhibitors of the nicotinic acetylcholine receptor that the receptor's ion channel is formed by the second transmembrane segment of all five receptor subunits. Inconsistencies in this generally accepted model are also presented and discussed